主要仪器、试剂、供试材料
双光束紫外可见分光光度计、RE-52AA开元体育(湖南)有限公司官网仪、SHZ-III循环水式多用真空泵、电热恒温水浴锅。
纯化水、50%乙醇、氯仿、乙酸乙酯、儿茶素对照液、香草醛、盐酸
分别称取两份过40目筛的茶树老叶粉末10.0g于250ml圆底烧瓶中, 分别向其中加入100ml 80℃纯化水, 用恒温水槽在60℃下提取45min。后用真空泵抽滤, 滤渣再加100ml浸提液提起, 共提取三次, 后合并三次滤液, 60℃下浓缩。浓缩液用50ml氯仿脱咖啡因两次。弃去氯仿层。水层用等体积乙酸乙酯萃取三次, 萃取完成后, 将乙酸乙酯相在开元体育(湖南)有限公司官网仪中40℃下减压蒸馏, 浓缩萃取物并回收乙酸乙酯。得到的浓缩物于60℃下干燥, 便得到茶多酚样品。2.3 醇提茶多酚分别称取两份过40目筛的茶树老叶粉末10.0g于250ml圆底烧瓶中, 分别向其中加入100ml 50%乙醇, 用恒温水槽在60℃下提取45min。后用真空泵抽滤, 滤渣再加100ml浸提液提起, 共提取三次, 后合并三次滤液, 滤液用开元体育(湖南)有限公司官网仪在60℃下减压浓缩, 并回收乙醇。浓缩液用50ml氯仿脱咖啡因两次。弃去氯仿层。水层用等体积乙酸乙酯萃取三次, 萃取完成后, 将乙酸乙酯相在开元体育(湖南)有限公司官网仪中40℃下减压蒸馏, 浓缩萃取物并回收乙酸乙酯。得到的浓缩物于60℃下干燥, 便得到茶多酚样品。2.4 含量测定儿茶素是茶多酚类物质中有价值的组分, 因此本试验是以茶多酚提取物中儿茶素的含量作为评价各种提取方法的好坏以及茶多酚样品质量高低的依据。本研究所采用的分析方法是香草醛显色法。2.4.1 样品液和对照品液以及显色剂的制备。精密称取样品0.0500g, 用水超声溶解 (30min) , 移入50ml容量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 即得样品溶液。精密称取儿茶素对照品0.0129g, 置25ml容量瓶中, 乙醇加至刻度, 溶解摇匀, 即对照品溶液。取香草醛1g, 加盐酸100ml使溶解, 即得1%香草醛浓盐酸试液。